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　　1、從液氮中取出凍存的試驗(yàn)用宿主細(xì)胞，在37℃溫水中迅速融化，用毛細(xì)吸管移植于含有細(xì)胞維持液的細(xì)胞管內(nèi)，吹吸數(shù)次，使混勻,立即離心(3000r/min，3min)，去上清液。再加入適當(dāng)?shù)募?xì)胞維持液，吹吸數(shù)次，使混勻，同上離心后，轉(zhuǎn)種于加有10培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中。逐日觀(guān)索細(xì)胞生長(zhǎng)情況，在細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)單層時(shí)，用于消毒試驗(yàn)。

 

　　2、取出低溫凍存的試驗(yàn)病毒毒種，37℃水浴融化，用細(xì)胞維持液作10倍稀釋?zhuān)缓蠼臃N于已經(jīng)長(zhǎng)滿(mǎn)單層細(xì)胞的細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，置37℃溫箱中，使與細(xì)胞吸附、生長(zhǎng)。逐日觀(guān)察病變，待3/4細(xì)胞出現(xiàn)病變時(shí)，收獲病毒。

 

　　3、將含有病毒及宿主細(xì)胞的培養(yǎng)液，在冰浴條件下，用超聲波(或反復(fù)凍融)破碎宿主細(xì)胞，釋放病毒。然后，盡快離心(6000/min,15min)去除沉淀(主要為細(xì)胞碎片)，上清液即為所需的病毒懸液。按每管1.0分裝于無(wú)菌離心管(1.5)中。

 

　　4、取1支病毒懸液，按病毒滴度測(cè)定法，測(cè)定其病毒滴度。其余均冷凍保存于-80℃?zhèn)溆谩?/div>

　　病毒滅活試驗(yàn)三種機(jī)理