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皮膚變態反應試驗方法及基本流程
發布時間:2024-12-02 101

  ?皮膚變態反應試驗是一種通過重復接觸某種物質后機體產生的免疫傳遞的皮膚反應。?在人類中,這種反應可能表現為瘙癢、紅斑、丘疹、水皰等癥狀;而在動物身上,可能只表現為皮膚紅斑和水腫?。


  皮膚變態反應試驗的主要目的是確定化妝品原料或產品是否會引起皮膚變態反應及其程度。它是化妝品安全性毒理學試驗的重要組成部分,適用于化妝品和新原料的研究及安全評估?。


  皮膚變態反應試驗方法及基本流程


  ?皮膚變態反應試驗的主要方法包括皮膚斑貼試驗、劃破試驗、皮內試驗和體外皮膚變態反應試驗。這些試驗方法各有特點,適用于不同類型的變態反應檢測,確保了試驗的準確性和有效性。?


  (1)?皮膚斑貼試驗?:


  受試部位通常選擇上背部脊柱兩側的正常皮膚。如果皮脂過多,可以用75%乙醇輕輕擦拭,然后用生理鹽水清洗待干?。


  將變應原按順序置于惰性聚乙烯塑料或鋁制斑試器內,貼敷在受試部位,并用手掌輕壓以排出空氣。


  觀察結果,通常在48小時后去除斑貼,等待30分鐘后觀察第一次結果,72小時后再次觀察結果,必要時可在1周后進行第三次觀察?。


  (2)?劃破試驗?:


  選擇前臂屈側為受試部位,局部清潔消毒。


  用消毒的種痘刀或針尖劃數條長0.3~0.5厘米的劃痕,滴生理鹽水1滴,然后將受試物涂于劃痕上,留一劃痕僅滴生理鹽水作陰性對照。


  20分鐘后用消毒蒸餾水洗凈劃痕,觀察反應變化?。


  (3)?皮內試驗?:


  選擇前臂屈側為受試部位,局部清潔消毒。


  將欲試抗原以無菌生理鹽水適當稀釋,分別吸取0.1毫升注射于受試部位皮內。同時注射多種抗原時,應在注射部位做標記。


  觀察結果,通常在注射后觀察局部反應?。


  (4)?體外皮膚變態反應人細胞系活化試驗(h-CLAT)?:


  使用體外培養的人急性單核白血病細胞(THP-1細胞),與受試物共暴露24小時后,使用熒光抗體染料對細胞表面分子CD86、CD54染色并用流式細胞儀測定。


  通過測定細胞表面標志物的改變來評估受試物是否具有致敏性?。


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